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凝胶电泳操作注意事项
发布人:viking2000    浏览 2733 次    时间:2012年12月19日    
琼脂糖:不同品牌琼脂糖的纯度和质量有较大的差异,对琼脂糖电泳的效果影响很大,建议在实验中使用品质稳定的琼脂糖。

凝胶的制备:凝胶制备用缓冲液应与电泳缓冲液一致,确保凝胶充分融化,制胶过程中要尽量避免产生气泡,凝胶需充分凝固但不宜放置时间过长,可根据实验环境适当调节以确保电泳效果。

DNA凝胶的浓度:不同分子量的 片段应选择适宜的凝胶浓度来进行分离。

电泳缓冲液:电泳缓冲液应经常更换,确保电泳环境清洁和保持电泳所需的离子强度和pH值。

电泳样品:PCR样品最好在24h内进行电泳,回收样品应尽量缩短在紫外光下的照射时间,提取的DNA样品在电泳前须去除蛋白和多余的盐分。

电泳样品上样量:各样品的上样量应基本一致,上样量过多可能导致上样孔超载,出现条带拖尾,上样量太少不足以铺满孔底会导致条带亮度不均匀。

电泳时的电压:电泳时应根据电泳槽、凝胶浓度和所分离样品的片段大小选择合适的电压,最大电压不宜超过20V/cm,温度<30,大分子量DNA电泳,温度<15
,
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发布人:viking2000 发布时间:2012年12月19日已被浏览 2733
 
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