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DNA Marker使用问题分析
发布人:viking2000    浏览 2555 次    时间:2012年12月19日    
一、条带模糊    
1、凝胶浓度不合适     
对于长片段,低浓度胶分离效果好;对于小片段,高浓度的胶分辨率高。  
2、电泳缓冲液缓冲能力差     
电泳缓冲液多次使用后,离子强度降低,pH值上升,缓冲性能下降,可使DNA电泳产生条带模糊和不规则的DNA带迁移的现象。     
3、电压太高,电泳时间长     
电泳时电压不应该超过20V/cm,电泳温度应该低于30℃。如果电泳时电压和温度过高,可能导致出现条带模糊和不规则的DNA带迁移的现象。特别是电压太高易出现缺带现象。电泳过程中由于会产热,因此电泳时间长容易发生带模糊,特别是小片段会变的模糊。   
4、凝胶放置时间太长  
5、DNA上样量多   
6、琼脂糖的质量差,导致DNA条带分辨率 

二、亮度不够 
1、上样量少   
2、EB浓度低    
如电泳结束后,用 EB染胶的方法,则染胶时间短。    
3、DNA Marker 降解 
污染了核酸外切酶。建议用灭菌的枪头,用后及时将管盖拧紧。 
点样时将电泳缓冲液带入DNA Marker中,建议及时更换枪头。,
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发布人:viking2000 发布时间:2012年12月19日已被浏览 2555
 
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