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PeproTech重组细胞因子常见问题解答
发布人:viking2000    浏览 1834 次    时间:2012年8月9日    
PeproTech公司的重组细胞因子产品经过了十分严格的生产、纯化及质检过程,保证其在投放市场之前,达到如下要求:
1. 真实性:重组蛋白产品一致经过N末端氨基酸序列分析;必要时应用SDS-PAGE, RP-HPLC和质谱(MS)检测其真实性。
2. 纯度:应用SDS-PAGE和RP-HPLC方法分析产品纯度。
3. 生物活性:进行相应的体外(in vitro)或体内(in vivo)活性检测。
4. 蛋白含量:通过紫外光谱分析,SDS-PAGE电泳检测;必要时应用HPLC定量标准蛋白溶液。
5. 内毒素:kinetic LAL法检测内毒素。
6. 微生物:重组蛋白在装瓶之前都经过滤除菌处理。

  产品随附的说明书上载有产品的各项相关信息。请仔细阅读这些信息,了解其配制和贮存提示。如果在阅读说明书后仍需更多信息,请查看以下常见问题解答,或致电我们的技术服务部门。

重组细胞因子的冻干状态
与市场上已有的其他蛋白产品不同,PeproTech细胞因子不含carrier protein或其他添加物(如BSA、HAS、蔗糖等),而是以低盐的形式做冻干处理,因此微量的细胞因子在冻干过程中会沉积于管内,形成很薄或不可见的蛋白层。PeproTech的质控过程确保每管装有非常准确量的蛋白产品。所以我们建议在收到试剂后,务必于开盖前先离心20-30秒,使可能附于管盖或管壁的蛋白成分聚集于管低(此时能否见到白色沉淀均属正常现象)。

重组细胞因子活性单位(units)的换算
各公司在开发出重组细胞因子并检测其活性后,通常会以ED50(半数有效浓度)或units(活性单位)来标识其细胞因子的生物活性。因此1mg细胞因子中所含的活性单位(units)可以理解为将1mg/ml细胞因子原液稀释成ED50的稀释倍数,以下是二者的换算公式:

重组细胞因子的稳定性
除非产品说明书上另有特别说明,否则所有PeproTech蛋白产品都为冻干粉形式,在室温下也能保持很好的稳定性。但是,我们推荐冻干产品最好保存于-20℃。大多数冻干产品经溶解和稀释后,可短时间保存于4℃;若要进行较长时间保存,我们建议稀释到工作液浓度并加入一定的carrier protein(如0.1% BSA),然后分装保存于-20℃。请注意每一次冻融过程都会造成蛋白的部分变性,应避免反复冻融。

重组细胞因子的交叉活性
除了少数例外,大多数人类细胞因子对小鼠细胞都有活性。许多小鼠细胞因子对人类细胞也有活力表现,但是与相应的人类细胞因子相比比活力较低。一些人类的细胞因子如IL-7在小鼠细胞中甚至表现出比相应的小鼠细胞因子更高的比活力。而干扰素、GM-CSF、IL-3 和IL-4 是物种特异性的,对于非人类细胞几乎没有活性。相反,成纤维细胞生长因子 (FGFs) 和神经营养因子 (neurotrophins) 是高度保守的,在其它的动物物种细胞中也能表现很好的活性。

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发布人:viking2000 发布时间:2012年8月9日已被浏览 1834
 
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